Checklite ATP-eliminerande Kit för 250-analyser

CheckLite ATP Eliminating Kit används för mikrobiella biomassastudier baserade på ATP-mätmetoden. Alla levande celler, inklusive mikroorganismer, använder ATP som energikälla. Därför kan den totala cellmassan bestämmas genom att mäta bioluminiscens med hjälp av luciferasreaktionen. Normalt görs detta genom att extrahera ATP från provet med hjälp av ATP-frisättande reagens, såsom i CheckLite 250 Plus. Detta kräver dock att den extracellulära ATP är låg.
Ett stort problem är dock att extracellulärt ATP kan vara flera storleksordningar högre i vissa prover, vilket hindrar känslig detektion av intracellulärt ATP. ATP-elimineringsreagenset eliminerar extracellulär ATP till mycket låga koncentrationer och möjliggör riktad detektering av bakterier.

1 x 250 analyser

Testets varaktighet: 30-40 minuter
Förvaring: 2-8 °C, får EJ FRYSAS
Kit Sammansättning
ATP eliminerande reagens:
5 injektionsflaskor rödrosa-märkta
Rekonstitutionsbuffert för ATP-elimineringsreagens:
5 injektionsflaskor gula märkta

Beredning av reagens
ATP-eliminerande reagens hålls under vakuum i en rödaktig rosa-märkt injektionsflaska.
Häll rekonstitutionsbufferten från den gulmärkta injektionsflaskan i den öppnade rödrosa märkta injektionsflaskan och låt den stå i rumstemperatur i några minuter.
Rör om injektionsflaskan försiktigt så att det inte bildas skum tills innehållet är helt upplöst.
Rör inte kanten på flaskan eller toppen av gummiproppen direkt med händerna, eftersom detta ibland kommer att höja reagensets blankvärde.
En injektionsflaska med ATP-elimineringsreagens kan användas för mer än 50 analyser under normala förhållanden.
Anmärkningar för hantering av prover
Koncentrationen av ATP i levande celler förändras snabbt. Extrahera därför ATP från celler eller frys cellerna omedelbart efter provtagning. Även vid extraktion kan det vara nödvändigt att hämma eller förstöra ATP-nedbrytande enzymer för att förhindra att enzymer minskar ATP-koncentrationen.

Förbehandling av prover
3.1. Fasta prover:
Behandla provet med en stomacher eller en homogenisator och använd sedan supernatanten för följande mätning.

3.2. Vätskeprover:
När provlösningen är grumlig, färgad eller innehåller hämmande joner, såsom Cl-, späd provet efter behov.

ATP-nedbrytning av prover
Lägg 1 ml prov i provröret.
Tillsätt 0,1 ml ATP-elimineringsreagens i provröret och blanda väl.
Låt provröret stå i rumstemperatur i 30 till 40 minuter. Det är viktigt att hålla reaktionstiden konstant för att uppnå god reproducerbarhet. Om du testar flera prover ska varje provrör stå i rumstemperatur under samma tid.
Efter reaktion vid rumstemperatur ovan används proverna för bioluminescensanalysen nedan.